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求用 USUC已知基因启动子区域化学修饰如何分析

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紫凝baby

求用 USUC已知基因启动子区域化学修饰如何分析

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3 个回答

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sswei

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基因启动子区域的DNA高甲基化或致癌基因启动子区域的DNA低(去)甲基化(OG激活)都将会导致肿瘤关键信号通路的异常改变,进而使正常细胞发展成为肿瘤细胞。

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土井挞克树

有帮助

以是否符合中心法则来分析修饰的可行性。

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loveliufudan

有帮助

如果您已经确定了某个基因的启动子区域,并且想要研究化学修饰在该区域的分布情况,可以采用以下步骤进行分析:

DNA甲基化分析:使用甲基化特异性的酶(如MspI、HpaII等)和甲基化敏感的酶(如MspI、HpaII的同源酶MspI、HpaII等)进行限制性内切酶分析(RE分析),或者使用甲基化敏感的PCR扩增来检测启动子区域的DNA甲基化状态。还可以使用甲基化微阵列(MeDIP-chip)或基于测序的甲基化分析(如BS-seq)等高通量技术来分析DNA甲基化。

染色质免疫沉淀(ChIP)分析:使用化学修饰特异性的抗体,如对H3K4me3、H3K9ac、H3K27ac、H3K27me3等修饰的抗体,对USUC已知基因启动子区域进行ChIP实验,然后进行PCR扩增或高通量测序来检测修饰的分布情况。

碳水化合物修饰分析:使用特异性的抗体(如对O-GlcNAc修饰的抗体)进行ChIP实验,或者使用荧光标记的花生四糖结构类似物(如Alkynyl-UDP-GalNAc)来标记和检测碳水化合物修饰。

组蛋白修饰分析:使用化学修饰特异性的抗体(如对H3K4me3、H3K9ac、H3K27ac、H3K27me3等修饰的抗体)进行ChIP实验,然后进行PCR扩增或高通量测序来检测修饰的分布情况。

需要注意的是,化学修饰分析需要使用特异性的抗体或限制性内切酶等特异性试剂来检测目标化学修饰的存在和分布情况。同时,还需要进行严格的质量控制和数据分析,以确保实验结果的准确性和可重复性。

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