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过表达OVA的质粒构建

相关实验:细胞转染

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巴巴里阿

各位老师好。目前在尝试构建表达卵清蛋白OVA的MC38-OVA细胞。拜读了刘小乐教授的CRISPR screen的那篇文章。里面刘教授团队使用了pCI-neo-mOVA addgene#25099和pCI-neo-cOVA addgene#25097的质粒,使用Gibson assembly亚克隆到lentiCRISPR v2 blast addgene#83480中。准备的过程中我发现pCI-neo-mOVA和pCI-neo-cOVA质粒中的原件都是一样的,OVA肽的基因序列完全一样,请问各位大佬,是哪个部分使得pCI-neo-mOVA是膜表达的,pCI-neo-cOVA是胞质表达的呢?我在做分子克隆的时候,我应该将pCI-neo-mOVA中的哪部分克隆到载体里呢,只将OVA抗原肽克隆过去是不是不行?

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