慢病毒感染敲基因pcr结果表达增高

最开始感染病毒用Qpcr鉴定敲除效率都做出来了感染效率有70％多，最近仍然用最开始的引物鉴定了四次了都是过表达了，也有加嘌呤霉素筛选，对照细胞几乎都死了，说明病毒转进去了，为什么会过表达呢，主要是之前确确实实做了好几次都是敲低的，求大神指点