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求问MTT实验为什么做不出趋势?

相关实验:细胞增殖检测:MTT 法

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dafa92

转染48小时后的细胞重新铺96孔板,做了好多次根本没什么趋势,我也是头一次接触,求问有什么技巧?

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3 个回答

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土井挞克树

有帮助

1.MTT需要避光2.MTT中细胞种板这个操作环节需要注意,要及时吹打避免细胞成团,或者有人将消化好的细胞吹匀分装至1.5 ml EP管里,进行接种,并且每次接种前都会吹打细胞以增加接种到孔里后细胞的密度一致性。3.如果克服了接种密度的问题,还是不理想,那就用克隆形成实验,尽管MTT是快捷、成本很低的了

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loveliufudan

有帮助

如果MTT实验中无法观察到明显的趋势,可能存在以下几种情况:

细胞密度不一致:在做MTT实验时,细胞密度的不同会影响细胞的增殖和代谢能力,因此建议在实验前统一细胞密度,并确保各孔细胞数量相同。

处理剂量和时间不合适:MTT实验的处理剂量和时间需要根据不同的实验目的和试验物质进行调整,如果处理剂量过低或时间过短,可能无法观察到明显的影响。建议对处理剂量和时间进行多组试验,找到最适合的条件。

操作不规范:MTT实验的操作流程需要严格控制,包括细胞处理、MTT染色、还原剂溶解等各个步骤。如果操作不规范,可能会影响实验结果。建议认真查阅相关文献和实验操作手册,按照标准操作流程进行实验。

实验条件不稳定:MTT实验对实验条件的要求比较高,如温度、CO2浓度、培养基等各个条件都需要严格控制。如果实验条件不稳定,可能会影响实验结果的准确性。建议在实验前检查和调整实验条件,确保实验过程中各项条件的稳定性。

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balalaLy

有帮助

一般是先铺板再转染,然后做细胞活性。

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