sswei
通常情况下,对于24孔板的DNA转染,每次用2μl左右,则1.5mlLipo2000约可转染750个孔;对于24孔板的siRNA转染,每次用1μl左右,则1.5mlLipo2000约可转染1500个孔。
土井挞克树
一个推荐每孔siRNA用量是5pmol。
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根据文献报道和实验经验,Lipo2000转染剂用量和siRNA用量的最佳比例因实验条件和试验目的而异。以下是一些参考用量,但需要根据具体实验情况进行调整:
Lipo2000转染剂用量:通常建议使用0.5-2.5 μl Lipo2000/1 μg siRNA,但也可以根据细胞类型、孵育时间、siRNA浓度等因素进行调整。对于A549细胞,建议先进行荧光染色体检测和细胞毒性实验,确定合适的Lipo2000用量和最大可耐受的浓度。
siRNA用量:通常建议在Lipo2000转染剂用量的基础上使用20-100 nM的siRNA。对于A549细胞,可以首先进行siRNA浓度梯度实验,确定最佳浓度范围,然后在此范围内选择适当的用量。
需要注意的是,siRNA转染后的效率和细胞内浓度与细胞类型、siRNA序列、Lipo2000用量和操作方法等因素密切相关,因此建议在每个实验中进行优化和验证。
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