心细北方
做HEK293细胞转染,传代两次后细胞状态就不好了,贴壁没问题,但生长的时候不是铺满整个培养瓶底,而是成簇团聚,有的密集的地方还出现空洞,团聚的细胞形态很模糊,挤压在一起,不知道是什么原因,求助下!
loveliufudan
这种情况可能是由于以下一些原因导致的:
过度传代:HEK293细胞虽然可以进行长期传代,但过度传代会导致细胞生长减缓,形态变差。建议每次传代不要超过10倍左右。
染色体不稳定:HEK293细胞是一种染色体不稳定的细胞系,经常出现染色体异常和突变。如果细胞已经连续传代多次,可能会导致染色体的不稳定性增加,从而影响细胞的生长和形态。
感染:HEK293细胞有可能被细菌、真菌或者病毒感染。如果在细胞培养过程中没有严格控制消毒和无菌操作,可能会导致细胞感染,从而影响细胞的生长和形态。
营养不足:细胞在生长过程中需要足够的营养物质来维持其正常的生理活动,包括葡萄糖、氨基酸、维生素等。如果培养基中某些关键的营养物质缺乏,可能会导致细胞生长缓慢,形态变差。
建议您可以检查您的实验操作是否规范,比如消毒、无菌操作是否严格,培养基配制是否正确,是否添加足够的营养物质等。如果问题仍然存在,可以尝试更换新的细胞系或重新培养HEK293细胞,注意控制传代倍数和营养物质的供给,避免感染等问题。
dxyc42u
有可能是传代过程中过度消化导致的
huarenqiang5
主要考虑原因是:1、血清和培养基的质量;2、细菌、霉菌、支原体等污染。
sswei
可能在消化过程中有部分细胞裂解所致