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包毒侵染Hela,puro筛选3-5天,等细胞不死的时候加dox诱导目的基因敲降,验证敲降效果后冻存

相关实验:细胞转染

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dxy_oypkkcr4

包毒侵染Hela,puro筛选3-5天,等细胞不死的时候加dox诱导目的基因敲降,验证敲降效果后冻存稳转细胞,但后面复苏在诱导敲降时无敲降是什么原因导致的,冻存细胞未经过dox诱导

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3 个回答

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土井挞克树

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说明你没有敲除成功,或者这个蛋白还有别的通路控制。

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Dr_劉医生

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目的基因敲除没出错的话,考虑冻存细胞复苏后的功能活性。

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juyue2010

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筛选没有完成,你需要看的是对照细胞在puro作用下都死掉,puro需要每2-3天换一次,细胞太密了,它也无法杀死细胞

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