ris-Glycine凝胶，Bis-Tris(MOPS)凝胶，Bis-Tris(MES)凝胶、在电源时如何选择、他们的原理是什么

Bis-Tris 类凝胶系统是一种预制聚丙烯酰胺小型凝胶系统，可对非变性蛋白和蛋白复合物进行灵敏的高分辨率分析、分子量估算和纯度评估

Bis-Tris 凝胶的工作原理

在 SDS-PAGE 中，SDS 充当电荷转移分子，它可以让蛋白带净负电荷，从而使蛋白变性并向阳极迁移。BN PAGE 采用考马斯 G-250 染料作为电荷转移分子，该染料附着在蛋白上使其带净负电荷，同时保持蛋白处于非变性、天然状态。NativePAGE Bis-Tris 凝胶系统具有近中性 pH 环境，可以为蛋白和凝胶基质提供较大稳定性，从而对非变性膜-蛋白复合物进行高度灵敏的分析，且相对于传统 Tris-甘氨酸预制胶系统能够提供出色的条带分辨率。

ris-Glycine凝胶、Bis-Tris(MOPS)凝胶、Bis-Tris(MES)凝胶都是常用的蛋白质电泳凝胶。

在选择电源时，应根据凝胶的类型和大小来选择合适的电源电压和时间。一般来说，凝胶越大，电源电压就应该越低，时间也应该更长，以避免凝胶过度加热和烧焦。

ris-Glycine凝胶是一种传统的SDS-PAGE凝胶，适用于较小的蛋白质，电源电压一般为100-200V，时间为1-2小时。

Bis-Tris(MOPS)凝胶和Bis-Tris(MES)凝胶是一种新型的蛋白质电泳凝胶，适用于中等大小的蛋白质。Bis-Tris(MOPS)凝胶的电源电压一般为150-200V，时间为1-2小时；Bis-Tris(MES)凝胶的电源电压一般为100-150V，时间为1-2小时。

这些凝胶的原理是基于离子电泳的原理，通过在电场中将带电蛋白质分离成带电的带，然后根据带的大小和位置来确定蛋白质的分子量和相对量。在电泳过程中，凝胶的pH值和离子浓度对蛋白质迁移速度和凝胶分离性能有很大影响，因此需要根据样品特点和实验需要来选择不同的凝胶类型和电泳条件。

Tris-Glycine系统的情况，主要包括三种离子：

a) 氯（-），由胶缓冲液提供，由于相对于系统中其它的阴离子，阳极对它具有最高的吸引，因而充当先导离子。

b) 甘氨酸(-)，电泳缓冲液提供的主要的阴离子，由于在一个带电的环境中，它仅仅部分带有负电荷，并且保持在带有更高电荷的氯离子的后面，充当后随离子。

c) Tris碱（+），出现在胶和电泳缓冲液中的共同的离子，在电泳时，Tris-Glycine系统中凝胶和缓冲液的离子形成了胶分离区域的9.5的工作pH值。

Bis-Tris系统主要包括三种离子：

a) 氯（-），由胶缓冲液提供，充当快速移动的先导离子。

b) MES或MOPS（-），（取决于电泳缓冲液的选择）充当后随离子。

MES: 2-(N-morpholino) ethane sulfonic acid

MOPS: 3-(N-morpholino) propane sulfonic acid

c) Bis-Tris碱（+）充当出现在胶中的共同离子，Tris（+）由电泳缓冲液提供。

合并低pH值的胶缓冲液（pH6.4）和电泳缓冲液（pH7.3-7.7）导致了电泳时显著降低的工作pH值。

Bis-tris是一种两性离子缓冲剂，pH缓冲范围为5.8-7.2。Bis-Tris可以和Cu(II)和Pb(II)形成稳定的配合物，和其它金属离子形成的配合物稳定性较弱，因此在含有金属离子的溶液中使用Bis-Tris，需要考虑到它和金属离子形成配合物的生成常数。在不同类型的电泳实验中，Bis-Tris可以用来制备样品缓冲液、凝胶缓冲液及电泳缓冲液，也可用作阴离子交换层析实验中的缓冲液组分。由于Bis-Tris具有较低的导电率和高的灵敏性，可以用作核磁共振波谱法实验中的缓冲液组分。Bis-Tris不适合用于二喹啉甲酸的检测。

Bis-Tris凝胶和Bis-Tris凝胶用于小分子蛋白，Ris-Glycine凝胶用于大分子蛋白。Ris-Glycine凝胶适用于pH 8.6-9.0，Bis-Tris凝胶（MOPS）适用于pH 7.3-7.7，Bis-Tris凝胶（MES）适用于pH 5.5-6.7。

小分子蛋白选择Bis-Tris凝胶（MOPS）和Bis-Tris凝胶（MES），大分子蛋白使用Ris-Glycine凝胶。因为这些凝胶在pH范围和缓冲能力上有所不同。Ris-Glycine凝胶适用于pH 8.6-9.0，Bis-Tris凝胶（MOPS）适用于pH 7.3-7.7，Bis-Tris凝胶（MES）适用于pH 5.5-6.7。