毛利小五郎的徒弟
封闭不足,背景存在污染,建议多冲洗几遍
小小翻车鱼
可能原因:试剂污染,抗体结合到封闭剂。
解决方法:使用新鲜配置的试剂;过滤封闭液;选用其他类型封闭液。
huarenqiang5
考虑可能是脱脂奶来源和批次不同或二抗溶液存放不当导致。
周末也要努力呀
封闭剂没有混匀,提前配置牛奶或者BSA封闭
粥辰辰辰辰
可能性较大的是一抗浓度太高,作用时间太长或蛋白量过大
小小小小小芳
1. 抗体浓度过高
2. SDS造成非特异性结合
3. 二抗试剂的非特异结合
高山云初
大概是试剂污染了,抗体结合到封闭剂