agrin蛋白转膜的条件是啥啊？试了很多条件都不行

转膜条件80v，30min就可以将蛋白转印，最多不超过60min，只要marker成功转移到膜上，相应的分子量就转移过去了。

1. 膜的选择：选择合适的薄膜是进行大蛋白转膜的关键。常用的薄膜有聚乙烯膜（PE膜）、聚丙烯膜（PP膜）和聚偏氟乙烯膜（PVDF膜）等。不同的膜具有不同的特性，如耐酸碱性、耐高温等，根据实验需求选择合适的膜材料。

2. 转膜缓冲液：转膜缓冲液的选择应根据目标蛋白的性质和转膜装置的要求来确定。常用的转膜缓冲液有Tris缓冲液、甘氨酸缓冲液等。转膜缓冲液的pH值和离子浓度应适当调整，以保证蛋白的稳定性和转移效果。

3. 转膜电流：转膜电流的选择应根据目标蛋白的大小和转膜时间来确定。通常情况下，较小的蛋白分子需要较低的电流，较大的蛋白分子则需要较高的电流。转膜时间一般为1-2小时，过长的转膜时间可能导致蛋白的损失。

4. 转膜时间：转膜时间的选择要根据蛋白的大小和转膜效果来确定。通常情况下，较小的蛋白分子转膜时间较短，较大的蛋白分子转膜时间较长。转膜时间过短可能导致蛋白未能完全转移到薄膜上，而过长的转膜时间则可能导致蛋白的损失。

5. 转膜装置：转膜装置有多种选择，常用的有半湿式转膜装置和干式转膜装置。半湿式转膜装置适用于较小的蛋白分子，干式转膜装置适用于较大的蛋白分子。在使用转膜装置时，要注意装置的清洁和消毒，以避免杂质对蛋白转膜的影响。

6. 转膜温度：转膜温度的选择要根据蛋白的稳定性和转膜效果来确定。一般情况下，较低的转膜温度有助于保持蛋白的活性和稳定性，但过低的温度可能导致转膜时间延长。较高的转膜温度可以加快转膜速度，但要注意不要超过蛋白的热稳定性范围。

7. 转膜后处理：转膜后，可以对转膜膜进行染色、修剪和固定等处理。染色可以检测蛋白的转膜效果，修剪可以去除不需要的转膜区域，固定可以固定蛋白在薄膜上，防止后续操作中的蛋白流失。

对于分子量10-15kDa的指标转膜时间不宜过长，100V、冰浴45min；对于分子量指标150kDa以上的指标，100V、冰浴2h；其他介于15-150kDa之间的指标100V、冰浴1h。

使用300毫安1小时左右即可了