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WB转膜液中Tris的作用是什么呢

相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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北纬30度到此一游


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7 个回答

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于小鱼鱼1998

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tris能提供碱性环境,然后提供一个缓冲作用

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sswei

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Tris-甘氨酸转膜缓冲液是用于蛋白印迹实验(Western blotting)中湿法以及半干法电泳转膜的缓冲试剂。本产品为配制1L 10XTris-甘氨酸转膜缓冲液的粉剂(不含甲醇),使用前加1L蒸馏水或去离子水溶解即可,溶解后10X缓冲液,各组分浓度为250mM Tris, 2.5M Glycine。

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小小翻车鱼

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Tris(三羟甲基氨基甲烷)是一种弱碱性缓冲剂,在Western转膜液中具有以下作用:

1. 保持电荷平衡:WB转膜过程中,蛋白质从凝胶转移到膜的过程主要是通过电场力驱动的。Tris作为一种缓冲剂,可以维持稳定的pH值,使得蛋白质携带的电荷在电场中保持平衡,从而实现更有效的转移。

2. 维持蛋白质稳定性:Tris可以维持Western转膜液的pH值稳定,从而有助于保持蛋白质的结构稳定性,减少蛋白质在转膜过程中的降解。

3. 降低非特异性结合:Tris可以降低Western转膜液中蛋白质与膜之间的非特异性结合,从而提高特异性信号,使得WB结果更加清晰。

4. 提高转膜效率:Tris可以帮助优化转膜条件,例如电流强度和时间,从而提高转膜效率和信噪比。

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北纬30度到此一游user-title

请问这个有参考的相关资料或者相关书籍吗?如果有的话,可以推荐一下吗?谢谢

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粥辰辰辰辰

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Tris有很高的缓冲能力,在水中溶解度高,对很多酶反应是惰性的,使Tris成为用于许多生化目的非常满意的缓冲液。

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此用户已注销

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Tris缓冲液不仅被广泛用作核酸和蛋白质的溶剂,还有许多重要用途。Tris被用于不同pH条件下的蛋白质晶体生长。Tris缓冲液的低离子强度特点可用于线虫(C. elegans)核纤层蛋白(lamin)的中间纤维的形成。 Tris也是蛋白质电泳缓冲液的主要成分之一。此外,Tris还是制备表面活性剂、硫化促进剂和一些药物的中间物。Tris也被用作滴定标准物。

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高山云初

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Tris被用于不同pH条件下的蛋白质晶体生长。Tris缓冲液的低离子强度特点可用于线虫(C. elegans)核纤层蛋白(lamin)的中间纤维的形成。Tris也是蛋白质电泳缓冲液的主要成分之一。此外,Tris还是制备表面活性剂、硫化促进剂和一些药物的中间物。Tris也被用作滴定标准物。

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huarenqiang5

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Tris在PH7.5-9.0之间有很高的缓冲能力,在水中溶解度高,对很多酶反应是惰性的。一般用于稳定反应体系的pH。

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