丁香实验_LOGO
登录
提问
我要登录
|免费注册

菌液酶标仪od600怎么测,需要添加显色什么的吗?

相关实验:🔥 蛋白质的原核表达

user-title

dxy_yn5g3wy9

wx-share
分享

3 个回答

user-title

粥辰辰辰辰

有帮助

实验室确定细菌生长密度和生长期,多根据经验和目测推断细菌的生长密度。在遇到要求较高的实验,需要采用分光光度计准确测定细菌细胞密度。OD600是追踪液体培养物中微生物生长的标准方法。以未加菌液的培养液作为空白液,之后定量培养后的含菌培养液。为了保证正确操作,必须针对每种微生物和每台仪器用显微镜进行细胞计数,做出校正曲线。实验中偶尔会出现菌液的OD值出现负值,原因是采用了显色的培养基,即细菌培养一段时间后,与培养基反应,发生变色反应。另外,需要注意的是,测试的样品不能离心,保持细菌悬浮状态。

user-title

此用户已注销

有帮助

光的吸收度A=abc,其中a为吸光系数,单位L/(g·cm),b为光在样本中经过的距离(通常为比色皿的厚度),单位cm , c为溶液浓度,单位g/L。实对于OD600吸收度影响最大的是光在样本中经过的距离,比色皿光是横向通过,酶标仪光是纵向通过,比色皿的厚度为1cm,那么只要在酶标板中加入菌液使其深度也达到1cm(一般300uL左右),然后检测OD600的值,扣除LB本底的吸收度,就可以大致估算出OD600的值。

user-title

sswei

有帮助


第一步在仪器的光度计模式中,先把波长走到600nm;

第二步放入我们的空白样品,进行调零操作;

第三步放入样品直接显示样品的T值(透过率值),之后带入OD值与T值的换算公式中可以得到OD600。个人感觉以后光度计可以直接增加测定OD值的功能,简单的办法就是在测量模式中直接加入OD选项,只需要简单的编程就可以。

提问
扫一扫
丁香实验小程序二维码
实验小助手
丁香实验公众号二维码
关注公众号
反馈
TOP
打开小程序