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静心观照
1、可能是SDS-PAGE胶中存在气泡或者某不溶性颗粒
解决办法：配胶过程中要小心，使用无杂质的液体。配胶用的海绵垫，如果用了很久之后，会从下面往上面漏小气泡，当气泡足够小并且胶快凝固的时候，走到中间的小气泡就停留在胶内，并会影响到后面的跑胶。另外配胶用的水，SDS，Tris缓冲液要注意不要有杂质，需过滤后使用。
2、置胶有问题
解决办法：把胶配好，不合格的胶坚决不用。可能是胶没有配置好，胶凝固后不均一。另外还有一种可能是样品中含有太多杂质，没有离心下来，然后杂质沉积在孔的中间，蛋白自然被推挤到两边。
高山云初
第一点灌胶要匀，第二转膜要注意排气泡，及保持低温防止胶变形。
小小翻车鱼
条带不均匀在实验中出现可能是由于多种原因导致的。以下是一些建议，可以帮助改进实验并实现均匀的条带：
1. 确保操作规范：在整个实验过程中，确保遵循正确的操作流程，避免交叉污染，同时确保正确的温度和时间。
2. 确保样品均匀：确保加入微孔板中的样品是充分混合的，且浓度一致。可以使用涡旋混合器或移液器反复吹打，以实现样品的均匀混合。
3. 使用新鲜试剂：确保使用的抗体、抗原、酶标记物和底物都是新鲜的。这些试剂可能会随时间而失活，从而导致实验结果出现偏差。
4. 优化浓度：优化实验中各个组分的浓度，包括一抗、二抗、抗原和底物。过高或过低的浓度都可能导致条带不均匀。
5. 调整实验条件：如果条带不均匀是由酶催化反应所致，可以尝试调整实验条件，如温度、反应时间和pH值等，以优化反应条件。
6. 清洁微孔板：确保微孔板在使用前彻底清洁，并避免在实验过程中引入杂质。可以使用清洁剂或酒精擦拭微孔板，以去除残留物。
7. 确保微孔板质量：确保微孔板的质量良好，以确保实验结果的准确性。可以使用新的微孔板进行实验，以排除微孔板问题导致的条带不均匀。
8. 检查仪器：确保酶标仪等实验仪器工作正常，校准仪器以消除设备误差。
9. 优化洗涤步骤：确保洗涤充分且规范，以避免非特异性结合导致条带不均匀。
10. 结果分析：在分析实验结果时，注意背景值的影响，并进行适当的校正。如果条带依然不均匀，可以尝试重新实验，排查问题所在。
通过上述方法进行改进，可以提高实验结果的准确性，实现均匀的条带。如果问题仍然存在，可以进一步分析实验条件和操作，以找出可能的原因。
