western blot 总是出现这样的情况，想问有老师知道是什么原因导致的吗

背景太深，多数情况下是封闭不好，跑胶时间适当延长，再有就是多拍几张照片就好。

一抗的特异度差的原因，建议更换一抗，然后相应降低一抗浓度

背景高是有污染，建议去除污染，然后延长一抗孵育时间

一抗染色时间太长，或着没有清洗干净

原因1： 膜封闭不够，封闭不充分或封闭液不合适；

解决方法：WB检测前选择更加合适的封闭液，并适当延长优化封闭条件时间与温度。

原因2：一抗稀度不合适、孵育温度过高；

解决方法：对抗体进行滴度测试，选择最合适的抗体稀释度，可以4℃结合过夜。

原因3：抗体孵育浓度过高，孵育时间过长

解决方法：优化或适当降低减少抗体孵育浓度与时间。

总是有拖尾的情况可能是你蛋白有些降解或者一抗浓度过高，或者封闭不完全，而且条带有的空白可能是转膜没夹紧或有气泡