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求助WB一抗属性

相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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郭郭1003

我是用的鼠肠类器官提取蛋白跑WB,用的一抗有鼠来源的,课题组有老师说鼠的样本就不能用鼠来源的抗体,但是一抗能不能用不是看它说明书上的reacted with吗?

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3 个回答

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麻黄连翘赤小豆

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对,可以用小鼠抗小鼠,说明书能用就可以,就有时候会有非特异性条带出现

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loveliufudan

有帮助

一抗的选择通常需要根据实验的目的和研究对象进行判断。虽然一般来说,避免使用与样本来源相同的抗体可以减少非特异性的结合,但这并不意味着绝对不能使用鼠源的抗体来检测鼠源的蛋白。

实际上,一抗是否适用并不仅仅取决于其说明书上标明的反应物种。很多时候,一抗的适用性还需要考虑其他因素,如特异性、交叉反应性以及对目标蛋白的亲和力等。

建议您参考以下几点来判断一抗是否适用于您的实验:

1. 交叉反应性:查看抗体的相关文献和技术资料,了解该抗体是否已经被证实在鼠类样本中有良好的交叉反应性。

2. 抗体特异性验证:通过实验验证抗体对目标蛋白的特异性。例如,可以使用已知表达目标蛋白的鼠肠类器官样本进行验证实验。

3. 正对照组:设置适当的正对照组,例如使用不同物种来源的细胞或组织,以确保抗体的特异性和交叉反应性。

如果您的实验条件允许,建议在初始实验中进行一些控制实验,验证一抗在您的鼠肠类器官样本中的适用性。这样可以确保您获得准确和可靠的结果。


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土井挞克树

有帮助

一抗是可以选择小鼠的。一抗应选择物种相同或有交叉反应的抗体,抗体可能与不同物种的同种靶蛋白有交叉反应,因其氨基酸序列同源性较高。

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