WB转膜为什么一张膜有蛋白，另一张没有呢

可能有以下几个原因：

1. 转膜条件不均匀：转膜时，电流密度、时间和电场的均匀分布都非常重要。如果转膜条件不均匀，可能导致蛋白在膜上的分布不均匀。这可能是由于不同区域之间的电阻差异，或电泳槽中的电流不均匀分布等原因。您可以尝试优化转膜条件，确保电流均匀分布，并且蛋白能够均匀地转移到膜上。

2. 样品加载量不均匀：如果您在转膜之前加载的样品在不同区域上有差异，那么膜上的蛋白分布也会不均匀。确保在进行SDS-PAGE电泳之前，将样品均匀地加载到凝胶上，避免在转膜时出现不均匀的蛋白分布。

3. 转膜效率差异：不同蛋白质可能具有不同的转移效率。一些蛋白质可能更容易转移到膜上，而其他蛋白质可能由于其特定的物理化学特性而不易转移。这可能是由于蛋白质的大小、疏水性或电荷等因素。在选择转膜条件时，要考虑样品中存在的不同蛋白质的特性，并可能需要调整转膜条件以增加转膜效率。

4. 膜的质量或处理差异：不同批次的膜可能具有不同的质量和性能。确保使用质量良好的膜，并遵循适当的处理和保管方法。如果使用的膜来自不同的供应商或不同的批次，可能会出现蛋白分布差异。

建议看看一抗和二抗的抗性是否正确，然后用BCA试剂盒检测一下蛋白浓度，看看是不是蛋白含量太少，如果曝光出actin可以将转膜条件设置为350mA 1.5h试一下。

可能是操作过程中有问题（可能原因是（1）、结合底物会不会有问题，即没有充分结合好，或者结合时间太短，（2）、要确定两张膜都是用新的底物反应液，（3）、就是没有信号的膜会不会压片时间太短。