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SDS-PAGE蛋白电泳实验,设置同样的电压,但是不同时间做,电流相差很大,有时不出带,为什么会出现这种情况?如何消除?

相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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TheRainbow777


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5 个回答

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dxy_mqg1dtg8

有帮助

电流相差很大的情况可能是由以下因素导致的:

1. 导体溶液与电极的接触:导体溶液的质量和均匀性会影响电流的稳定性。如果导体溶液不均匀或者电极与导体溶液接触不良,电流可能会波动,导致出现电流相差很大的情况。

2. 蛋白样品加载不均匀:如果样品加载不均匀,电流可能会因为不同位置上的电阻不同而出现波动,导致电流相差很大的情况。

3. 蛋白胶的制备:如果蛋白胶制备不均匀或者存在气泡,会导致电流波动,导致电流相差很大的情况。 

为消除这些因素带来的影响,可以采取以下方法: 

1. 导体溶液和电极的接触要均匀,可以使用特别设计的电导胶来加强接触。 

2. 样品加载要均匀,可以在样品的两侧间隔加载,或者使用更细的样品加载器,或者使用样品前先混匀。

3. 制备蛋白胶时,要仔细去除气泡,并在制备前将胶液均匀混合。 

4. 如果以上方法都不能解决问题,可以尝试使用恒定电流电源来进行电泳,这样可以避免电压波动带来的影响。 

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FrEShAIFE

有帮助

可能和你电泳液的新旧程度有关。内槽放新配置电泳液,外槽放旧液。而且不出条带的话,也有可能是转膜的问题,转膜的时候也要关注电流电压的大小。

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沫子大大

有帮助

可能与样品装载不均匀,凝胶浓度不同,缓冲液的ph或电流装置不良等相关,建议改善,保证每次实验条件相同。

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TheRainbow777user-title

不知道什么原因导致的电流偏差大,因为其它操作都一样呀,如何能确定原因?

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sswei

有帮助

可能存在电泳缓冲液浓度过高或过稀情况,需要正确配置新鲜电泳缓冲液。

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TheRainbow777user-title

电泳液就是新配制的,就是比原来电流高,环境温度对这影响大吗?

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balalaLy

有帮助

电泳液和电转液的离子成分会影响电流电压。

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