土井挞克树
1500r,时间设置为3-5min
loveliufudan
1. 血浆离心:
- 建议使用无抗凝剂的血液收集管(例如,凝固管)来收集全血样本,并在采集后立即进行离心。
- 建议以相对低速离心,大约为1000-2000 × g,离心时间可设置为10-15分钟。
- 目标是将血液分离为红细胞沉淀层(底部),血浆层(上部)和白细胞/血小板沉淀层(界面层)。
2. PBMC分离:
- 将血浆小心倒入新的离心管中,避免带入底部的红细胞沉淀层和界面层的白细胞/血小板沉淀。
- 加入PBS(磷酸缓冲盐水)或类似的缓冲液,使总体积增加,以稀释血浆。
- 建议在低速离心下进行PBMC分离,通常为200-400 × g,离心时间约为10-20分钟。
- 分离后,可以注意到白色的PBMC层在离心管的底部,上方是血小板和其他细胞残留物。
请注意,这些建议是一般性的指导,离心速度和时间可能因实验目的、设备类型和离心管的规格而有所不同。因此,最好在实验室中进行优化和验证,以确保获得最佳的血浆和PBMC分离结果。此外,为了确保PBMC的完整性,可以在离心前将缓冲液预先加热至体温,并尽量避免剧烈振荡和震动,以减少细胞受损的风险。
sswei
一般是转速;3000转/min,时间3min。
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