汤姆卜丽波
首先做好定量,按照标准曲线加内参,少的多加点,如果还是不齐,那就可能是内参不对,换一个内参
毛利小五郎的徒弟
1.定量是否准。样品的浓度要在标准品画成的标准曲线中部;标准曲线的R方要大于0.99;枪头插紧,避免有气泡。配样品时要注意弹匀每个组分。
2.跑胶过程中,如果无法锁定量程的话,要看一下每一枪加的是否一样。
3.选择一个适合自己实验的内参。我所知道的常见的内参有beta-tubulin, GAPDH。如果研究的基因与代谢相关,可能就不太适合选择GAPDH。不过也需要多试一试,内参是齐的就可以选作其为内参。
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