dxy_i7scehz2
现在在做趋化因子CXCL12对乳腺癌细胞MDA-MB-231的趋化迁移实验。查找文献有的下室只加CXCL12,有的还会添加一点血清,但是添加血清不就是另外加了因子导致细胞被趋化了吗???做了好多次下室只加CXCL12的,浓度在100-800ng/ml都试过,没有明显的趋化作用并且实验很难重复,而且是用RTCA做的,造了好多蛋白和板子了TT。
趋化因子做迁移难道还有不为人知的秘密在里边吗(冷漠脸。。。)
求解答求解答~
huarenqiang5
可以参考一下这篇文献《CXCL12诱导乳腺癌细胞CXCR4表达并促进癌细胞骨转移》。
dxy_i7scehz2
感谢!但是这篇文章写的很不清楚,包括在下室加了添加CXCL12的培养液等。还有细胞染色的图不是很准确。
毛利小五郎的徒弟
可以加血清的,加血清更容易出结果。
loveliufudan
您提到的血清添加到趋化实验中的确可能引入其他因子,从而影响实验结果。因此,一些研究者会避免使用血清,以确保实验结果的准确性。不过,有些研究也会使用少量的血清,比如1-2%的血清,以提高细胞的存活率和增加实验的可重复性。因此,具体是否添加血清应该根据您的实验设计和目的来决定。
在进行趋化实验时,除了趋化因子本身的浓度外,还有一些其他的因素可能会影响实验结果,例如细胞密度、培养时间、下室成分等等。因此,如果您的实验结果没有明显的趋化作用,您可以考虑一些可能的原因,并进行一些调整和优化。以下是一些可能有助于提高趋化实验可靠性和重复性的建议:
优化细胞密度和培养时间:细胞密度和培养时间会影响细胞的状态和响应能力。您可以尝试在不同的细胞密度和培养时间下进行趋化实验,以寻找最佳条件。
确定最佳的趋化因子浓度:不同的趋化因子对于不同的细胞可能有不同的最佳浓度范围。您可以尝试在一定范围内逐步增加或减少趋化因子的浓度,以确定最佳浓度范围。
使用不同的下室成分:下室成分对趋化实验也有影响。您可以尝试使用不同的下室成分,比如血清替代物或特定的成分,以寻找最适合您实验的下室成分。
采用其他趋化实验方法:除了RTCA,还有其他趋化实验方法可以使用,比如Transwell实验和Boyden室实验等。您可以尝试采用其他方法进行趋化实验,以增加实验结果的可靠性和重复性。
总之,在进行趋化实验时,需要考虑多种因素的影响,进行综合优化和调整,才能得到可靠和重复的实验结果。
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