求助，植物总蛋白跑胶染色问题

1:胶一和胶二中4和5泳道样品是一样的（烟草总蛋白，同一批样品），为什么胶二中除了核糖体大小亚基外有明显的其它的带，是胶的问题吗？图二中4.5泳道染色后条带正常吗？之前没注意过是否有这么多带。

2:两块胶每个泳道的最上方（浓缩胶和分离胶界面）都聚集有一条很大的条带，是植物中本来就有比较多这么大的蛋白吗？如果是蛋白多聚体，那么样品煮沸变性后不应该解聚了吗？比较疑问这一部分是什么，为什么跑不下来？

3:两块胶均为变性胶，跑变性胶样品一定要煮吗？不煮的话loading里面也有sds，是否能变性蛋白，仍依据分子量跑胶分开不同大小蛋白？（图1中8.9为未煮样品，6为煮了的样品，上样量接近一致，但是条带深度相差较多，为什么会导致这种情况？

有没有懂的前辈，望解答