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coip求助 coip后打质谱筛选到的蛋白又wb验证不到了为什么呀

相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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安安way

就是之前coip拉了A蛋白 然后去送了质谱 当时挑到了一个蛋白B 然后拿coip去验证AB结合的时候又拉不下来了 为什么呀

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4 个回答

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bamboopiggy

有帮助

所以coip的结果,还是要验证的,你最好。同时再挑一个别的蛋白,证明你的ip过程是没有问题的。

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灵枢天问

有帮助

可能蛋白量增加了需要对应加大你的洗脱液

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土井挞克树

有帮助

可能是结合的问题,结合紧密的后续测不到。

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balalaLy

有帮助

1、B蛋白没有跟A 结合,是质谱前的coip拉的蛋白没有洗干净。

2、验证时的coip没有做好,细胞处理的时间点、蛋白裂解不充分、裂解液作用太强了把互作的蛋白打开了、wb抗体的问题

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