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镍柱纯化蛋白浓度过低怎么处理?

相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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Frigting

该镍柱可以纯化出蛋白,经SDS-PAGE也可得到目的条带,但在做WB是未显现出条带,经检测得到浓度为0.6mg/ml,现在计划通过更换填料以提高蛋白纯化效率,求助大家更换填料的经验。

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3 个回答

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小小小小小芳

有帮助

如果想吧蛋白浓度提高一点的话,纯化时减少凝胶的体积,增加洗脱液中的咪唑浓度。

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灵枢天问

有帮助

我们的镊柱可以通过反复平衡液洗涤再生,你可以试试

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毛利小五郎的徒弟

有帮助

提高SDS-PAGE的上样量 将蛋白样品超滤浓缩几倍提高浓度 WB压片时间稍微延长一点

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