求助|大家是怎么提组织样的总蛋白的？

1.你取了中肠以后，先用pbs洗一下，然后直接放入lysis（+cocktail）中，研磨，研磨过程中全程冰上放置。研磨完以后，冰上放置5-10min，然后再离心，然后再加上样buffer煮。

2，如果还是做不出来，可以考虑用液氮快速快速冰冻，然后用研钵研磨，然后加入lysis，冰上放置5-10min，然后再离心，然后再加上样buffer煮。

1、处死虫子，剪开腹腔，取出中肠组织。

2、平皿中放入6ml预冷0.9%NaCL。

3、在平皿中剪碎组织，并转移到匀浆器。

4、预冷裂解液中添加PMSF（20ug/2ml）。

5、取2ml预冷裂解缓冲液，迅速加入匀浆器，冰浴条件下充分研磨。

6、组织研磨液转移至1.5ml离心管。

7、4℃，15000rpm，离心10min。

8、取上清组织蛋白粗提取液至新的1.5ml离心管。

9、进行蛋白定量，-80℃保存。

要不然试试液氮快速冷冻然后研磨

我们一般是用RIPA（强）裂解液，你可以试试这个