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新手小白WB条带分析不懂,求大佬指点

相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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白昼树dd1

第一张是加抗鼠的一抗二抗 目的蛋白

电泳是上胶80V 20分钟 下胶120V90分钟

转膜是200mA 90分钟

第二张是加抗兔的一抗二抗 内参

希望大佬们指点一下,我重新跑胶的时候marker的条带会朝两边斜,是胶没制好,还是说加样的问题?

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5 个回答

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医路向前Dr夏

有帮助

第二条有黑点,可能是样本问题。

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balalaLy

有帮助

Marker的问题应该是上样量没有配平,Marker两个孔补点2x loading buffer,

内参条带很弱,说明总蛋白量很低,也是导致图一目的蛋白条带弱的原因。

条带上有黑点,杂点,可能是封闭液没有溶解好,或者 洗膜buffer不干净

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whilt-shirt

有帮助

第一张图抗体有点问题,第二张图有可能是上样量太低了

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Eason老歌迷

有帮助

有几个问题需要注意,一个是maker上样量可以少一点,一个是制胶需要搅匀,一个是电泳液不要使用太多次。

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求求不要翻车啦

有帮助

第二张图有小黑点,问题出现在奶粉没溶好。条带不清晰,或没有,跑电泳,染胶,如果条带清晰,说明是转膜的问题,蛋白都没转过去,可能是你夹三明治的问题。如果条带不清晰,说明你的样品有问题。

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