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为什么western的内参调齐了一次之后,再按齐的上样量跑actin又不齐了

相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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默默QRS

提蛋白定量之后按照那个上样量actin调上样量齐了,调但是因为齐的那次条带跑的不好看,有些歪,所以又做了两次actin,但是都不齐。齐和不齐最大的变量就是制胶的试剂盒换了。但是换了盒子之后跑的两次,actin不齐的趋势大致一样。想不明白为啥

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4 个回答

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yanlai000

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确定上样量一致,转膜条件一致,换配胶方式有可能会有这种情况

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Eason老歌迷

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我觉得可能有几个原因,一个是可能是你的样品反复冻融,有点降解了,也可能是你上样的时候手抖,上样量有误差,可能是你胶没有配好,没有混匀,就容易跑的不齐。

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whilt-shirt

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由于每次转膜的操作不是完全一样,再加上曝光液加的不一样,容易导致这种情况,建议多尝试几次

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bamboopiggy

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可以按照你后面的actin的条带,再重新调一下,有的时候,可能是部分蛋白出现降解了,actin可以能不齐,也可能是你上样量出现问题了。

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