dxy_ds0fz2r9
为什么显影时除了目的蛋白,背景中的其他蛋白也有些显影?就是背景看上去不干净,其他人做的除了目的蛋白,其他的都没有,就很干净。
墨幽染染
过高的蛋白上样或一抗和二抗浓度过高都会促使底物过快地消耗,导致我们在做化学发光检测时,发光底物,已经消耗殆尽而形成空斑
balalaLy
一个可能是抗体浓度高,适当降低一抗浓度,
另一个可能是抗体用的次数多,重新配一支
实在不行就得重新买抗体了
bamboopiggy
是你抗体的特异性问题,会有非特异性条带,如果趋势一致,可以不用管它
Eason老歌迷
背景有点脏,可能是你封闭没封闭到位。也可能是你的抗体的特异性不高。或者是你的洗膜没洗干净。
天一湖医者
封闭时间太短。还有一抗的稀释度是多少?不能太高,还有加二抗前洗膜了没有,洗了多久?还有二抗的稀释度是多少?在追求特异性的角度下,可以尝试尽可能的降低二抗浓度。