心细北方
WB实验用α-tublin作为内参,最近总是会有杂带。跑的是mcfs小鼠心肌成纤维细胞,不知道是什么原因,应如何改进?
balalaLy
内参抗体一般很少出问题,使用次数多或者抗体稀释液不好会容易出杂带。用5%bsa in tbst 稀释或者用商品化的抗体稀释液。
天一湖医者
1、更换一抗,换单克隆的。
2、不换一抗,降低一抗稀释比,这样目的条带会变弱,不过杂带也会,有时候就可以去掉杂带了。
3、多封闭一下。
4、洗膜的时候多洗几次。
Eason老歌迷
有几点需要注意。一个是封闭的时间可能稍微长一点。可以更换一个抗体试一试。
相关产品推荐