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western blot 内参相关问题?

相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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心细北方

WB实验用α-tublin作为内参,最近总是会有杂带。跑的是mcfs小鼠心肌成纤维细胞,不知道是什么原因,应如何改进?

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3 个回答

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balalaLy

有帮助

内参抗体一般很少出问题,使用次数多或者抗体稀释液不好会容易出杂带。用5%bsa in tbst 稀释或者用商品化的抗体稀释液。

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天一湖医者

有帮助

1、更换一抗,换单克隆的。

2、不换一抗,降低一抗稀释比,这样目的条带会变弱,不过杂带也会,有时候就可以去掉杂带了。

3、多封闭一下。

4、洗膜的时候多洗几次。

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Eason老歌迷

有帮助

有几点需要注意。一个是封闭的时间可能稍微长一点。可以更换一个抗体试一试。

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