内参不齐这是什么原因？样品浓度是5

1 可能这个管家基因不适合在你的实验中做内参，换个内参，2，bca法测蛋白浓度还是有差异的，你可以根据这个内参，然后读个灰度值，再重新调一下内参

你这个是胶的问题吧，这条带跟飞舞的小蝴蝶似的

调整上样量，如果还是调不齐，建议做灰度扫描，将目的蛋白的灰度值比上对应的内参，这样比较准确

单独上样可以出现，可以排除蛋白本身的问题，但混合一起加时却跑的不齐，最大的可能就是胶的问题，胶配的不均匀导致蛋白跑的不在同一水平。在就是抗体孵育问题，不知你是用孵育盒，还是用封膜孵育，一定要保证膜与抗体充分接触，保证孵育效果。三是显影剂是预混还是混合好的，注意混合比例