请问跑wb时候你们用PVDF膜还是NC膜 有什么区别

Nc膜与pvdf膜各有优缺点，至于选用哪种膜可以根据自己实验及研究经费情况来进行选择

都可以，看你们实验室的习惯，用发光试剂显影都可以，如果用荧光二抗，还是用nc膜，因为背景低

硝酸纤维素（NC）膜与蛋白质之间靠疏水作用结合，无需预先活化，对蛋白质的活性影响小；非特异性本底显色浅；价格低廉，使用方便。但结合在NC 上的小分子蛋白质在洗涤时易丢失；NC韧性较差，易损坏。聚偏二氟乙烯(PVDF)膜与蛋白质亲和力高，用前需在甲醇中浸泡，以活化膜上的正电基团，使其更容易与带负电荷蛋白结合。根据被转移的蛋白分子量大小，选择不同孔径的NC膜。因为随着膜孔径的不断减小，膜对低分子量蛋白的结合就越牢固。通常用0.45 μm 和0.2 μm 两种规格的NC 膜。大于20 KD 的蛋白可用0.45 μm 的膜，小于20 KD 的蛋白就要用0.2 μm 的膜。PVDF膜灵敏度、分辨率和蛋白亲和力比常规的膜要高，非常适合于低分子量蛋白的检测。

硝酸纤维素膜（NC膜）的结合能力主要与膜的硝酸纤维素的纯度有关，市场上有些硝酸纤维素膜（NC膜）通常会还有大量的醋酸纤维素，因而降低了蛋白的结合量。如果采用的是100%纯度的硝酸纤维素， 保证了最大的蛋白结合量，可达80-150μg/cm2。由于100%的纯度，因而也大大减少了非特异性的结合，降低杂交背景，无需高严谨度的洗脱步骤。其次，膜的强度和韧性也是需要考虑的因素。常规的硝酸纤维素膜比较脆，漂洗一两次就会破损，不能反复使用。

PVDF本质是一种疏水性的聚合物，在水溶液中不会浸湿，为了在水性缓冲液和系统中使用PVDF膜，首先必须将其浸泡在50%（v/v）或更高浓度的醇溶液中。（PVDF膜在使用时需预处理，用甲醇处理的目的是活化膜上的正电基团，使其更容易与带负电的蛋白结合。）甲醇、乙醇和异丙醇都适合浸泡这种膜。之后必须用水反复冲洗以去除醇类，经预处理的膜可以直接放入转印缓冲液中平衡。

0.2um PVDF膜内部表面积大约是0.45um PVDF 膜的三倍，使其吸附能力更高。PVDF膜是疏水性的，一般大于20kD的蛋白就可以用0.45μm的膜，小于20kD的蛋白就要用0.2μm的膜。

根据被转移的蛋白分子量大小，要选择不同孔径的硝酸纤维素膜（NC膜）。因为随着膜孔径的不断减小，膜对低分子量蛋白的结合就越牢固。但是膜孔径如果小于0.1mm，蛋白的转移就很难进行了。