WB条带周围总是黑黑的一团，不知道怎么回事

可能是发光液的原因，也有可能是封闭不完全

1.胶片曝光。

2.显影时间过长。

3.定影剂效果不好。

可能的原因

①膜封闭不够，建议延长封闭的时间；选择合适的封闭液。

②一抗稀释度不适宜，太高，选择最适宜的抗体稀释度。

③ 一抗孵育的温度偏高，建议4℃过夜孵育。

④选择的膜容易产生高背景，一般NC膜的背景会比PVDF膜低，但是NC膜吸附力也就差了一点。

⑤膜在整个实验过程中干过或手套反复接触过，实验过程中要注意保持膜的湿润，使用镊子夹取膜。

⑥检测时曝光时间过长，可减少曝光时间。