天一湖医者
根据你的实验目的确定你所需要的表达量,是采用一个含有强启动子的载体来过量表达蛋白,还是只需要一个普通的启动子即可。
根据上述原则初选出一些载体,然后找到这些载体的使用说明书(直接在网上找),里面有非常详细的说明,包括启动子信息、多克隆位点信息、载体使用范围、表达条件等。
dxy_gwrp7ndq
对细胞有毒性的蛋白,建议选用背景表达低、严谨调控诱导的菌株,如BL21(DE3) pLysS菌株。
对于带有稀有密码子的蛋白或来源于真核基因的蛋白,建议选用Transetta(DE3) 等菌株。
万千490
试不同的表达载体与菌株
不同的蛋白,对不同载体与菌株的偏好不同,如果某一表达蛋白无法通过优化诱导表达条件得到明显改善,可以更换其他菌株或表达载体。
whilt-shirt
T7启动子的载体(如pET系列载体)应选用BL21(DE3),BL21(DE3) pLysS,Transetta(DE3)等菌株。非T7启动子的表达载体(如Tac启动子的pGEX,pMAL系列表达载体)应选用BL21表达菌株。 r>
相关产品推荐