SDS-PAGE电泳怎么区别loading buffer质量好坏？以及电泳的注意事项？

Loading buffer即常用的电泳上样缓冲液，工作浓度是1X 。Loading buffer中的还原剂如DTT、beta巯基乙醇可以打开蛋白的二硫键、使之解聚为亚基；还可与蛋白结合使之沉于孔底，易于电泳；同时还有指示作用。一般选用好的公司生产的Loding Buffer。

电泳结束后，应及时冲洗电泳槽,以免盐离子沉积，导致电泳丝腐蚀。清洗电泳芯时，一定要注意别弄段电泳丝。

注意要待凝胶在室温凝固后，可在室温下放置一段时间使用。忌即配即用或4度冰箱放置，前者易导致凝固不充分，后者可导致 SDS 结晶。一般凝胶可在室温下保存4天， SDS 可水解聚丙烯酰胺。这可以提高 SDS-PAGE 电泳分辨率

SDS-PAGE 电泳关键在于胶是否制得均匀平整,当然这跟灌胶用的模具和方法有一定 关系。加入 TEMED 和过硫酸铵后丙烯酰胺开始聚合，但是过硫酸铵易被氧化，所以操作要迅速，而且最后要液封，保证模具内不漏气才能使胶聚合的很好。同时不要把制胶用的玻璃板中间压太紧，这样会使中间的胶偏薄，水封时要小心加入水不要剧烈扰动胶层，使某些地方的胶被稀释，总之一句话确保胶的各部分电阻率均匀，这样跑出的条带才不会歪掉。制胶水平比较好的胶从胶板上取下后应该是平整的，而不是某些地方翘起。