我在做Western Bloting时，加ddH2O稀释成，不知有影响吗？

在做Western Bloting的处理细胞那一步，处理完细胞，加入Loading Buffer煮蛋白时，本来是5×的Loading Buffer，加的时候按成1×的加入细胞蛋白中煮蛋白，也就是，本来加，也就是细胞和Loading Buffer应该按4：1加，结果我按成1：1加，如果我在做Western Bloting时，加ddH2O稀释成，不知有影响吗？