Native Page 为什么样品的下段都不见蛋白条带？

xiaoyudian

2013-10-10

第一次做 Native Page，请高手看看提出宝贵意见。我的实验条件：5% 浓缩胶，8% 分离胶；为加速凝固，AP和TEMED都加倍了。冰上预电泳 25mA，30 分钟，加样后电泳25mA 恒流 1 个小时。样品上样量 20ug，30ul；marker 是用于SDS-PAGE 的。我的问题是： 1、为什么样品的下段都不见蛋白条带？是样品降解了还是配胶问题或者电泳问题？ 2、跑出的蛋白条带很少，是上样量少了还是样品降解了？ 3、marker的下段条带都弥散了，是不是一定要用Native PAGE的专用 marker？谢谢啦！！

1 个回答

我是金博士

2013-10-10

有帮助

你的胶做得不太好啊，marker都分不开。你要是想知道条带少，是上样量少了还是降解了，可以做个上样量梯度，一般都会做个预实验，看看浓度。