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求问 2Xlaemmli sample buffer 怎么配制?

相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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阿颠

我最近要做 pulldown 分析,当珠子沉下后要用 2Xlaemmli sample buffer 洗脱,但是我不知道 2Xlaemmli sample buffer 怎么配制,求高手指导。2Xlaemmli sample buffer 与2Xloading buffer有什么区别!!还有 DDT 可以替代巯基丁醇吗?如果可以其中的量应该怎么替换呢?
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1 个回答

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liona_lin

有帮助
1. Sample Buffer, Laemmli 2× Concentrate:Solution contains 4% SDS, 20% glycerol, 10% 2-mercaptoethanol, 0.004% bromphenol blue and 0.125 M Tris HCl, pH approx. 6.8. 2. SDS gel-loading buffer (2X) 100 mM Tris-Cl (pH 6.8), 4% (w/v) SDS (sodium dodecyl sulfate; electrophoresis grade), 0.2% (w/v) bromophenol blue, 20% (v/v) glycerol, 200 mM DTT (dithiothreitol)Store the SDS gel-loading buffer without DTT at room temperature. Add DTT from a 1 M stock just before th
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