蛋白电泳中途不给力了怎么办？

赵栋2012

2013-02-25

跑电泳时，发现样品进入分离胶2 cm 后再也不肯向前移动，大约3.5个小时后我放弃了，估计它不会再移动了，marker 也没有分出条带，电泳缓冲液也是冰凉的，没有变热，进入分离胶后我用电压刚开始是90 v，后来改成100 v、200 v 都没有变化，我用的是pharmacia 的mini VE。

1 个回答

tao0129

2013-02-25

有帮助

1. 如果sample 先跑的动，后来就不动了，很可能就是缓冲液的问题，这时候单纯的提高电压是没用的。2. pharmacia 系统跑的时候可以清楚的看到电极丝上面有气泡形成，电压越高气泡越多。有气泡但是sample就是不动，那一定就是缓冲液问题。3. 检查缓冲液的时候，从配胶缓冲液开始查起，有些新同学在配胶的时候可能就是吧浓缩胶缓冲液和分离胶缓冲液弄混了。4. 另外，电泳缓冲液最好是用前现配，尤其是上面的那个chamber 里面的，最好是新鲜的。5. 另外，跑胶的时候可以在下面的chamber 里面放上冰袋，特别有助于降温。祝你成功！