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细胞培养上清中的蛋白浓缩后再煮沸,成了豆腐渣一样的东西是为什么?

相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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豆豆夫人

如题,收了两个细胞培养上清,一个是做了转染的,一个是对照。48h后提了上清,浓缩蛋白从6ml到几百微升,之后测了浓度7点多ug/ul,加了上样缓冲液和DTT之后煮沸。转染的那一组就完全变性了,成了豆腐渣一样的东西,闻着还有一股臭臭的味道。而对照那一组就比较正常…… 之后把转染那一组的上清重新离心(其实也没看到明显沉淀),取上清后加缓冲液DTT再煮沸,结果出现一样的情况…… 这是为什么?大家有遇到过同样的情况的吗,可能会是什么原因造成的呢?
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1 个回答

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远航TAJI

有帮助
说明过表达组培养基中有很多蛋白,分泌性蛋白就是大量存在于培养基,与对照组比较有区别,很正常的啊!我想问,你用什么耗材浓缩的培养基????
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