关于WB的sample buffer大家看下我的是不是有问题？

我在做a-syn的WB。分子量大概在19kD左右。因为有多聚体所以常常在30+，40+的位子有条带。别人文献中在19的位子条带很明显，但是我做出来19位子的条带却没有。30+，40+的位子倒挺明显的。是不是我的sample有问题我的配方是1 M trisHcl6.8 0.6ml；50%甘油1ml；10%SDS 2ml；水6.4ml。加了sample buffer后100度加热10min。大家觉得问题可能出在哪里？