为什么 WB 未显影？

转膜的时候，一张膜的电极放反了，就会导致蛋白没有转到膜上。

同意naqiu816的回答，我做过一次，同样的样品，一起做的两面，孵育同样的抗体，最后结果出来就不一样，曝光时间的长短也是一个影响

我认为在同一条件下，如果一张膜显影，一张膜未显影，可以逐一查找原因：首先，你是否两张膜上都设有阳性对照，如果有，一张膜有信号，一张没信号，可能是操作过程中有问题（可能原因是你结合底物会不会有问题，即没有充分结合好，或者结合时间太短，另外你要确定两张膜都是用新的底物反应液，还有就是没有信号的膜会不会压片时间太短，当让如果使用仪器扫片就不存在这种问题，）所以原因是在太多，你只能逐一排查。如果没有设对照，这个问题就更复杂，而且解决起来也不科学。希望对你有用吧！不过，最好，把你的压片结果能跟大家分享一下，这样更有利于大家帮你解决问题。

最有可能是你膜反了

我觉得，很难控制两个膜条件完全一样。即使你是同时做的两个，那一定有一个先上样，一个后上样，而且你跑胶的时候会发现，两块胶上的条带速度肯定是不一样的，转膜两个膜放的位置也肯定不一样，等等，也许这些小问题都不能导致你压片不出条带，我只是想说，两个条件不可能完全相同，western blot实验就是重复性比较差，所以一个出一个不出，这样是正常的。还有就是你的抗体到底好不好使，也不知道。

蛋白量是否足够

抗体不一样吧