RPA扩增产物不能与Cas12a反应

我想请教一下 如何判定好几天rpa引物好不好用？ 是同一DNA模板下 电泳 看条带亮度吗？

请问毛利小五郎的徒弟老师，那我看怎么文献里面都是RPA与cas12a结合呢

因为RPA的扩增产物会激活Cas12a酶的切割活性，然后被顺式切割导致模板失效，所以不与Cas12a反应。

可能的原因有几个可能：

扩增产物的长度不够：RPA（Recombinase Polymerase Amplification）扩增产物的长度一般在200-400bp之间，而Cas12a酶的作用需要靶向序列长度在23-30bp之间。因此，如果扩增产物的长度太短，可能无法被Cas12a酶识别和切割。

扩增产物的序列不符合Cas12a的靶向序列：Cas12a酶是一种特异性很高的核酸酶，需要与特定的靶向序列结合才能切割DNA。如果扩增产物的序列与Cas12a酶的靶向序列不匹配，就无法被Cas12a酶切割。

RPA扩增反应中可能存在一些成分或产物，干扰了Cas12a酶的活性：比如，RPA扩增反应中可能存在一些特定的盐、酶或试剂，这些物质可能会影响Cas12a酶的活性。此外，RPA扩增反应还可能产生一些其他的产物，如一些非特异性扩增产物或杂交产物，这些产物也可能会影响Cas12a酶的作用。