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PCR 结果

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大暴雨v

PCR新手,请问大神,出现这样的PCR结果,没有出现CT值都是目的基因的,另外,内参基因CT值很大,为什么会出现这些问题,有什么建议?谢谢!(第一张图是我第一次做的PCR,第二张是次日重复的,内参基因用的是GAPDH,2和3是标本号,C是肿瘤组织,N是正常组织,程序是按说明书设置的:95℃ 30秒;变性:95℃ 5秒;60℃ 45秒;cDNA A260/A280为1.80-1.84之间,)
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1 个回答

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午后的红太狼

有帮助
感觉是因为你提出来的RNA量太少的缘故,从你的内参的CT值可以看出来,可能你要检测的基因本来表达量就不高,内参的CT值不够低的时候,你的目的条带就扩不出来了,大概的看了一下,目的基因有值的那几个,基本都是内参测得比较低的几个,所以建议RNA多提一点,多逆一点,把内参的CT值降到20以下就差不多了
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