PCR 结果

大暴雨v

2021-10-21

PCR新手，请问大神，出现这样的PCR结果，没有出现CT值都是目的基因的，另外，内参基因CT值很大，为什么会出现这些问题，有什么建议？谢谢！（第一张图是我第一次做的PCR，第二张是次日重复的，内参基因用的是GAPDH，2和3是标本号，C是肿瘤组织，N是正常组织，程序是按说明书设置的：95℃ 30秒；变性：95℃ 5秒；60℃ 45秒；cDNA A260/A280为1.80-1.84之间，）

1 个回答

午后的红太狼

2021-10-21

有帮助

感觉是因为你提出来的RNA量太少的缘故，从你的内参的CT值可以看出来，可能你要检测的基因本来表达量就不高，内参的CT值不够低的时候，你的目的条带就扩不出来了，大概的看了一下，目的基因有值的那几个，基本都是内参测得比较低的几个，所以建议RNA多提一点，多逆一点，把内参的CT值降到20以下就差不多了