出现片状拖带或涂抹带该怎么办？

我是金博士

2013-02-22

设计了引物，严格按照分子克隆书上的实验步骤来，也优化了PCR的条件，可P来P去都是片状拖带或涂抹带，是我哪里操作不当吗？有啥办法改善吗？

hellokitty5

2013-02-22

有帮助

PCR扩增有时出现涂抹带或片状带或地毯样带。其原因往往由于酶量过多或酶的质量差，dNTP浓度过高，Mg2+浓度过高，退火温度过低，循环次数过多引起。其对策有：①减少酶量，或调换另一来源的酶。②减少dNTP的浓度。③适当降低Mg2+浓度。④增加模板量，减少循环次数