克隆时发生突变了怎么办？

偶然回头

2013-01-25

克隆结束的时候，送去公司测序，会碰到一些点突变的问题，是不是一定要重新克隆呢？因为从设计引物到PCR再都构建克隆载体，周期很长，实在不想重新开始，有办法可以回复突变？

zhongmindai

2013-01-25

有帮助

回复突变可以用定点突变（site-directed mutation） PCR，但是周期也不会短。克隆的片段不长的情况下，多挑几个去测序，里面肯定会有对的。尽量选用具有更高保真性的酶扩增。