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蛋白质体外磷酸化压出底物蛋白条带

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太宰治想好好活

我遇到一个问题,做体外磷酸化实验中,通过原核表达得到蛋白并且纯化,分为激酶、底物蛋白、激酶+底物蛋白三个组,用磷酸化抗体做WB时,单独的底物蛋白也被磷酸化抗体结合,压出条带,而且非常浓,这是为什么?是抗体不好吗?

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