退火温度难以确定

dxy_76iz4tq4

2019-09-23

两个引物的Tm值差距较大一个38.6一个46.5怎么确定退火温度？我做的rt-PCR只成功扩增过一次，温度大概在48摄氏度，后面做不出来，还试过44 46都没有了现在很懵，有什么意见吗？

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