荧光偏振实验mP值相反

偏振荧光的强弱程度与荧光分子的大小呈正相关，与其受激发时转动的速度呈反相关。FPIA最适宜检测小至中等分子物质，常用于药物、激素的测定。

可能是因为：1.反应条件：可能存在实验条件不适合荧光偏振测量的情况，如温度、pH值、离子浓度等。这些条件可能会影响荧光信号的强度和特异性。

2. 样品准备问题：样品的制备可能存在问题，如蛋白结合不充分、示踪剂的稀释不准确等。建议仔细检查样品制备步骤，并确保每个孔中的样品处理是一致的。

出现空白孔和buffer孔的mP值较高，而加示踪剂和蛋白结合的孔mP值较低的情况可能有以下几个可能的原因：

1. 背景信号：可能存在一些非特异性的背景信号，导致空白孔和buffer孔的mP值较高。这可能是由于试剂、缓冲液或其他组分中的荧光物质或自然荧光引起的。您可以尝试优化实验条件，如减少试剂浓度或更换缓冲液来降低背景信号。

2. 仪器校准问题：可能存在仪器校准不准确的情况，导致测量结果偏差较大。建议检查仪器的校准情况，并确保其正常工作。

出现空白孔、buffer孔和加示踪剂与蛋白结合孔的荧光偏振结果与预期相反，可能存在以下几个可能的原因：

荧光偏振仪器设置问题：首先，检查荧光偏振仪器的设置是否正确。确保正确选择了激发波长和检测波长，并且荧光偏振仪器的仪器校准和灵敏度调整是正确的。

试剂问题：检查使用的试剂是否正确，确保其纯度和质量良好。如果使用的缓冲液或示踪剂不合适，可能会导致荧光偏振信号异常或产生高背景信号。

操作错误：在操作过程中可能发生了错误，例如误加入污染物、重复操作或混淆样品。请仔细检查实验操作步骤，确保正确的样品和试剂配对。

光源问题：检查荧光偏振仪器的光源是否正常工作。如果光源质量不佳或老化，可能会导致荧光信号异常或高背景信号。

样品问题：样品的自身性质可能会对荧光偏振结果产生影响。如果样品存在固有荧光或背景干扰，可能会导致荧光偏振信号异常或高背景信号。在进行实验前，最好对样品进行预处理或净化，以减少背景信号。

可能是存在污染，指示孔和空白孔都有污染所以测出的值不准确

可能是由于样品中存在多种荧光分子,其中一些分子的偏振状态与激发光相反导致的。还可能是由于样品中存在旋转对称性的分子。

你可能处理时间不对，要么过短要么时间太长，建议你是设置时间梯度去测量，选择一个合适值，我之前也遇到过这个问题