求助🆘细胞种板后，想计算细胞培养板里每个孔的细胞数，应该如何操作？

计算方法：（4个大正方形内之细胞数目之和×稀释倍数× 104）/4=每 mL 悬液中的细胞数目。

细胞铺板后，可以使用显微镜和计数室来进行细胞计数。以下是一般的步骤：

1. 将培养皿或板放在显微镜上，调整放大倍数以便能够清晰地观察细胞。

2. 在计数室中，选择一个特定的区域来计数细胞。这通常是计数室中的一个小方格或一个已知面积的区域。

3. 使用显微镜的焦距调节，确保细胞清晰可见。

4. 使用计数室中的目标计数细胞。可以使用显微镜的移动台或计数室中的移动装置来移动视野，以便能够计数更多的细胞。

5. 计数细胞时，使用计数室中的计数规则，例如每个小方格中的细胞数或每个已知面积中的细胞数。

6. 统计计数室中的多个区域，以获得更准确的细胞计数。可以选择计数室中的多个不同区域进行计数，然后计算平均值。

7. 记录细胞计数结果。

一般用的是四各角落的大正方形，每个正方形有 16 个小格，长为1mm ，宽为1mm ，高为 0.1 mm，每个大正方形之体积为 1 mm²×0.1 mm=0.0001 mL。计算方法：（4个大正方形内之细胞数目之和×稀释倍数× 104）/4=每 mL 悬液中的细胞数目。

使用细胞计数板，用绸布拭净细胞计数板和盖玻片，采用推压法从计数板下缘向前平推盖玻片，将其盖在计数池上，再将按倍数稀释好的血液或液体混匀后滴入计数板，若在加样前，镜检发现计数板上有污物，还需重新准备。待细胞计数板充池后，应平置于桌面上静置2-3min，待细胞下沉。到使用细胞计数板计数时，可先用低倍镜观察整个计数板的结构(大、中、小方格)及特征，并且观察样本中充池的细胞分布是否均匀，如果严重分布不均，应重新充池。随后在充稀释液的计数池观察细胞计数范围，记录所数5个中方格的细胞和4个大方格的细胞数，即可计算细胞数量。

细胞铺板后可以根据显微镜下的汇合度，乘以孔板长满的细胞量，可以大致算出来对应的细胞量