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C57来源的BMDC做抗原提呈实验,请问该怎么做?

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Liaoyacong

我是想做小鼠BMDC的抗原提呈功能,主要看DC在抗原提呈前与发生抗原提呈后DC细胞的相关变化,请问该怎么做?方便的话,请提供详细步骤,感激不尽!

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2 个回答

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周末也要努力呀

有帮助



1. 骨髓细胞培养:从C57小鼠的骨髓中收集细胞,并将其培养在含有GM-CSF和IL-4的培养基中,以促进骨髓细胞分化为BMDC。


2. 培养BMDC:将骨髓细胞在培养皿中培养7-10天,每隔2-3天更换新的培养基。


3. 收集BMDC:收集培养皿中的BMDC,可以通过轻轻洗涤的方式将非附着的细胞收集起来。


4. 处理抗原:将需要研究的抗原(如蛋白质、多肽或细胞裂解物)加入到BMDC的培养基中,使其与BMDC相互作用。


5. 孵育:将BMDC与抗原共同孵育一段时间,通常为4-24小时。


6. 收集细胞:收集BMDC,可以通过轻轻洗涤的方式将非附着的细胞收集起来。


7. 流式细胞术:使用流式细胞术分析方法,通过染色和标记抗体来检测BMDC上的抗原提呈分子(如MHC类分子)的表达水平。


8. 数据分析:根据流式细胞术的结果,分析抗原提呈分子的表达水平和BMDC的抗原提呈能力。



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高山云初

有帮助

主要分为以下几步:

1.抽取外周血、并分离出血液中的单核细胞;

2.单核细胞经过体外诱导、可以变成未成熟DC;

3.把抗原装载在这些未成熟的DC身上;

4.诱导这些DC变为成熟DC、体外培养;

5.最后回输入体内

 

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