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求助🆘怎么用FITC标记细菌?可以在菌悬液里加入一定浓度的FITC,然后在菌的不同生长时期取样观察荧光情况吗?

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Crown1314

能不能用普通光学显微镜看到被染料标记的细菌呀?

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3 个回答

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loveliufudan

有帮助

是的,您可以使用FITC(荧光异硫氰酸酯)标记细菌。以下是一种常见的方法:

1. 准备FITC溶液:将FITC溶解在适当的溶剂中(例如二甲基亚砜或甲醇)以制备FITC溶液。注意,FITC对光敏感,因此在制备和使用过程中应避光。

2. 处理细菌:收集您感兴趣的细菌样品,可以是培养物或培养基中的细菌。确保细菌处于活跃生长期,并在适当的生长条件下培养。

3. FITC标记:将FITC溶液添加到细菌悬浮液中,并在适当的温度和时间下进行孵育。FITC会与细菌表面的特定官能团发生共价结合,实现标记。

4. 洗涤:标记后的细菌需要进行洗涤以去除未结合的FITC。使用适当的缓冲液(例如磷酸盐缓冲液)进行洗涤步骤。

5. 观察荧光:使用荧光显微镜或流式细胞仪等设备观察标记细菌的荧光情况。您可以在不同的生长时期取样并观察细菌的荧光变化。

请注意,在进行FITC标记时,注意以下几点:

• 标记过程中要避免光照,以防止FITC的降解。

• 适当控制FITC的浓度和标记时间,以确保细菌获得适量的荧光信号而不会引起过度标记或损伤。

• 在洗涤步骤中彻底去除未结合的FITC,以减少背景荧光的干扰。


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sswei

有帮助

不能用普通光学显微镜观察,需用共聚焦荧光显微镜观察FITC标记细菌。

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毛利小五郎的徒弟

有帮助

不建议用光学显微镜,还是要用荧光显微镜看比较准确

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